Tư Vấn Xét Nghiệm Miễn Phí : 0909 000 966

NHUỘM TẾ BÀO

samy nguyen

Moderator
Thành viên BQT
Mô sinh học vốn ít tương phản với kính hiển vi quang học hoặc điện tử. Nhuộm là phương pháp làm nổi bật các tính năng đặc biệt của mô cần quan tâm. Thuật ngữ hóa học của nhuộm được hiểu là histochemistry. Được sử dụng phổ biến nhất là vết Hematoxylin và eosin (vết H & E) soi dưới kính hiển vi quang học trong mô học và mô bệnh học. Hematoxylin, một thuốc nhuộm cơ bản, vết hạt nhân có màu xanh do mối quan hệ của axit nucleic trong nhân tế bào. Eosin, một thuốc nhuộm có tính axit, làm vết tế bào chất có màu hồng. Uranyl acetate và citrate chì thường được sử dụng để nhuộm mô với kính hiển vi điện tử.
Nhuộm màu: Có hàng trăm kỹ thuật khác nhau đã được sử dụng để chọn lọc vết tế bào và các thành phần tế bào. Các hợp chất khác nhau được sử dụng cho các phần mô màu bao gồm safranin, O dầu đỏ, Congo đỏ, nhanh chóng nhất là màu xanh của lá cây FCF, muối bạc, và nhiều thuốc nhuộm tự nhiên và nhân tạo thường có nguồn gốc từ thuốc nhuộm phát triển cho ngành công nghiệp dệt may.

Gần đây, kháng thể đã được sử dụng cụ thể là các protein, carbohydrate, và chất béo. Quá trình này được gọi là immunohistochemistry, hoặc huỳnh quang phân tử, miễn dịch huỳnh quang. Kỹ thuật này đã tăng khả năng lên rất nhiều để xác định loại của các tế bào dưới kính hiển vi. Kỹ thuật tiên tiến khác, chẳng hạn như nonradioactive lai tạo tại chỗ, có thể được kết hợp với immunochemistry để xác định cụ thể DNA hoặc các phân tử RNA với đầu dò huỳnh quang hoặc thẻ có thể được sử dụng trong miễn dịch huỳnh quang và enzyme, liên kết huỳnh quang khuếch đại (đặc biệt là alkaline phosphatase và tyramide khuếch đại tín hiệu). kính hiển vi Huỳnh quang và kính hiển vi cùng tiêu điểm được sử dụng để phát hiện các tín hiệu huỳnh quang với các chi tiết bên trong tế bào tốt. Máy ảnh số đang ngày càng được sử dụng để chụp hình ảnh mô học và mô bệnh học

Chung thí nghiệm vết tế bào
Stain

Sử Dụng Chung

Nucleus

Tế BàO ChấT

Tế Bào Máu Đỏ (Hồng Cầu)

Sợi Collagen

Cụ Thể Là Các Vết

Haematoxylin

Tổng nhuộm khi kết hợp với eosin (tức là H & E)

Màu xanh

N / A

N / A

N / A

Axit nucleic xanh

ER (lưới nội chất) màu xanh

Eosin

Tổng nhuộm khi kết hợp với haematoxylin (tức là H & E)

N / A

Màu hồng

Da cam / đỏ

Màu hồng

Sợi đàn hồi, màu hồng

Lưới sợi collagen sợi hồng hồng

Toluidine xanh

Tổng nhuộm

Màu xanh

Màu xanh

Màu xanh

Màu xanh

Mast tế bào hạt nhỏ màu tím

vết Masson của trichrome

Mô liên kết

Đen

Màu đỏ / hồng

Red

Xanh dương / xanh lá cây

Sụn-Xanh dương/xanh lá cây

Sợi cơ đỏ

vết Mallory của trichrome

Mô liên kết

Red

Nhạt màu đỏ

Orange

Màu xanh đậm

Keratin da cam

Xương sụn-màu xanh ma trận màu xanh đậm, cơ sợi màu đỏ

Đàn hồi Weigert của vết

Đàn hồi các sợi

Xanh dương / đen

N / A

N / A

N / A

Elastic fibers-blue/black

vết Heidenhain của AZAN trichrome

Phân biệt các tế bào từ các thành phần ngoại bào

Red / tím

Màu hồng

Red

Màu xanh

Sợi cơ đỏ

Sụn ​​xanh xương ma trận màu xanh

vết Bạc

Lưới sợi, các sợi thần kinh, nấm

N / A

N / A

N / A

N / A

Lưới fibers-brown/black

Thần kinh fibers-brown/black

vết Wright

Tế bào máu

Hơi xanh / tím

Hơi xanh / màu xám

Màu đỏ / hồng

N / A

Bạch cầu trung tính màu hột tía/màu hồng

Basophil hạt bạch cầu ái toan hạt sáng màu đỏ / cam, tím / tím đậm, tiểu cầu hột đỏ/màu tía

vết Orcein

Elastic sợi

xanh đậm [hoặc đỏ]

N / A

Màu đỏ tươi

Màu hồng

Sợi đàn hồi-màu nâu sẫm

Các tế bào Mast hạt cơ mượt màu tím ánh sáng màu xanh

vết định kỳ axit-Schiff (PAS)

Tầng hầm màng, địa hóa carbohydrate

Màu xanh

N / A

N / A

Màu hồng

Glycogen và các carbohydrate khác, màu đỏ tươi


Giải pháp nhuộm Haematoxylin
Những vết tế bào thường được sử dụng cho các nghiên cứu mô học. Các thuốc gắn màu được sử dụng để thể hiện cấu trúc hạt nhân và tế bào chất phèn và sắt, tạo thành hồ, phức hợp màu (thuốc nhuộm ăn màu mô), màu sắc trong đó sẽ phụ thuộc vào muối được sử dụng. Nhôm muối hồ thường có màu xanh-trắng, trong khi các muối hồ sắt màu xanh-đen.

Ba giải pháp Ehrlich sử dụng là haematoxylin phèn của haematoxylin, haematoxylin Harris, và haematoxylin Mayer. Tên haemalum là thích hợp hơn để miêu tả cho các giải pháp "haematoxylin" này vì haematein, một sản phẩm của quá trình oxy hóa của haematoxylin, là hợp chất kết hợp với các ion nhôm để tạo thành phức hợp kim loại thuốc nhuộm hoạt động. Giải pháp haematoxylin phèn là phổ biến nhất do hạt nhân của các tế bào màu đỏ khi soi dưới ánh sáng trong suốt, vết tế bào nhanh chóng biến thành màu xanh khi tiếp xúc với bất kỳ chất lỏng trung tính hoặc kiềm.

SƠ LƯỢC VỀ EA50, OG6, HEMATOXYLIN
Kỹ thuật Papanicoulaou cho phép thực hiện các nghiên cứu tế bào tin cậy nhất, có giá trị đặc biệt trong chẩn đoán ung thư cổ tử cung, vì cho phép quan sát tốt nhất các chi tiết của hạt nhân, bào tương mà các phương pháp khác không có. Trong kỹ thuật Papanicoulaou, hạt nhân được nhuộm bởi Hematoxylin de Harris và bào tương bắt màu của Orange G và Fast Green.

Để đánh giá mức độ hoạt động của Estrogen, Shorr là thuốc nhuộm lý tưởng nhất - bào tương được nhuộm bởi chất Orange G và Fast Green, còn hạt nhân được nhuộm bởi Biebrich Ecarlate, ngoài ra còn có các acid phosphotungstic và phosphomolybdic - với kỹ thuật này, các tế bào ưa eosine bắt màu đỏ, các tế bào ưa kiềm (cyanophile) có màu xanh da trời lẫn màu xanh lá cây nhạt.

EA-50, EA-50 hiệu chỉnh, và EA-65 là những vết cồn-bazơ được sử dụng trong xét nghiệm tế bào học để nhuộm tế bào chất thông thường bằng phương pháp Papanicolaou.

Orange G-6 là một vết cồn–bazơ được sử dụng trong xét nghiệm tế bào học để phát hiện sự hiện diện của chất sừng trong tế bào chất. Chất này đã được trích lọc trước khi đóng chai và sản xuất để phù hợp tối ưu.

Các loại Hematoxylin:

Gill1
Gill2: đậm đặc hơn Gill1
Gill3: đậm đặc hơn Gill2
Harris: thuốc nhuộm này là 1 bước tiến trong kỹ thuật niệu bào đồ, nó cho phép nâng cao một cách tốt nhất việc đánh giá chỉ số nhân đông, yếu tố quan trọng trong niệu bào đồ - chỉ số nhân chấm tụ màu (index pycnotique).
Mayer
Haematoxylin
(Wikipedia)


Công thức phân tử
C16H14O6
Mol khối lượng
302,28 g mol−1


Haematoxylin, tự nhiên màu đen, được chiết xuất từ ​​gỗ cây vang. Khi bị oxy hóa nó tạo haematein, một hợp chất có thể phức hợp màu mạnh mẽ với các ion kim loại nhất định, đáng chú ý nhất là muối Fe (III) và muối Al (III). Haematein kim loại phức hợp được sử dụng để vết tế bào hạt nhân trước khi soi kính hiển vi. Thường được gọi là cấu trúc vết sắt hoặc nhôm-haematein ưa bazơ, mặc dù cơ chế của nhuộm là khác nhau.

Haematoxylin và vết eosin là một trong các vết được sử dụng phổ biến nhất trong nghiên cứu vi giải phẫu tế bào và mô bệnh học. Nó là vết rất bền trái ngược với các vết tạm thời (ví dụ như giải pháp i-ốt trong KI).

Vết phổ biến khác là phosphotungstic axit haematoxylin, Một kết hợp của haematoxylin với phosphotungstic axit.

Năm 1970, do chặt rừng Brazil và khu vực Trung Mỹ, gây ra sự thiếu hụt nghiêm trọng của cây vang, nguồn tạo ra haematoxylin. Giá của haematoxylin đã tăng cao kỷ lục, ảnh hưởng đến chi phí của chẩn đoán mô bệnh học, đòi hỏi phải tìm kiếm chất nhuộm khác để thay thế. Trước khi sử dụng bất kỳ lựa chọn thay thế nào, haematoxylin trở lại thị trường, mặc dù ở một mức giá cao hơn, và tiếp tục vị trí của nó trong mô bệnh học. Có một số thuốc nhuộm được khuyến cáo để thay thế: Celestine xanh B (CI 51050), Gallocyanin (CI 51030), Gallein (CI 45445) và Solochrome cyanin (CI 43820). Tất cả bốn loại được sử dụng là thuốc ăn màu Fe (III). Một lựa chọn khác là thuốc nhuộm màu đỏ brazilin, khác với haematoxylin bởi chỉ có một nhóm hydroxyl.
 

Facebook Comment

HTML

Top